Ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis como biomarcador de daño genético en poblaciones sobreexpuestas a radiaciones ionizantes / Micronucleus assay as biomarker of DNA damage in population exposed to ionizing radiation

Resumen Introducción: las radiaciones ionizantes (RI) son capaces de perjudicar el ADN; para evaluar este fenómeno es posible utilizar la formación de micronúcleos como biomarcador de efecto temprano del daño radioinducido. El ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis (MNBC) es una técnica citogenética que permite demostrar el impacto de agentes genotóxicos. Propósito: en el presente trabajo se describieron mecanismos moleculares involucrados en la radioinducción de micronúcleos, la técnica del MNBC, los criterios de análisis, sus aplicaciones dentro de la investigación biológica y su extensión a la clínica, con énfasis en su empleo como biomarcador del daño genético en grupos sobreexpuestos a RI. Argumentos para la discusión: el MNBC se considera un método confiable, simple y rápido y existe evidencia de su aplicabilidad para el estudio de los efectos biológicos en casos de riesgo ocupacional y en accidentes radiológicos aislados o a gran escala. Conclusiones: el MNBC es una herramienta valiosa que posibilita estimar las consecuencias por dosis bajas de RI en poblaciones involucradas y, a la vez, orientar la toma de decisiones en cuanto a su prevención o atenuación . De igual forma, puede ser utilizado en análisis del campo de la radiobiología, a fin de detallar las incidencias de las radiaciones ionizantes sobre el ADN.

Abstract Introduction. Ionizing radiation (IR) is capable of causing DNA damage. For the evaluation of this phenomenon it is possible to use chromosomal aberrations as biomarkers. The Cytokinesis-Block Micronucleus assay (CBMN) is a cytogenetic technique that allows to demonstrate the effect of genotoxic agents.Proposition:in the present review, we will describe the molecular mechanisms involved in micronucleus radioinduction, the micronucleus technique and criteria for analysis, its applications within biological research and its extension in clinical research, with emphasis on its application as a biomarker of radioinduced genetic damage. Arguments for discussion: the CBMN is considered a reliable, simple and fast technique and there is evidence of its applicability in the evaluation of biological effects in occupationally exposed personnel and in isolated or large-scale radiological accidents. Conclusions: the CBMN a valuable tool in estimating radiological risk in populations exposed to low doses of IR, allowing to guide decision-making regarding prevention or mitigation of exposure to IR in populations involved. Similarly, the cbmn can be used in research in the field of radiobiology, as a means to describe the effects of ionizing radiation on DNA.

Análisis de genotoxicidad en eritrocitos de tortugas (Phrynops hilarii) de sitios antropizados y naturales de Entre Ríos, Argentina / Analysis of genotoxicity in erithrocytes of turtles (Phrynops hilarii) from anthropized and natural sites of Entre Ríos, Argentina

El test de micronúcleos (MN) es un biomarcador de genotoxicidad no destructivo que permite detectar daño cromosómico y otras alteraciones nucleares (AN). Phrynops hilarii es un quelonio de agua dulce que habita regiones del centro-norte de Argentina. El objetivo principal fue determinar la presencia de MN y otras AN en eritrocitos de poblaciones naturales de P. hilarii comparando sus frecuencias entre tres sitios, dos antropizados y uno de control (ciudades de Diamante y Paraná) de Entre Ríos, Argentina, durante el periodo 2015-2016. Dieciocho individuos (seis por sitio de muestreo) fueron evaluados en los sitios: 1- PD: Parque Nacional Pre-Delta (control), 2- AG: Salto Ander Egg (agroecosistema) y 3- SU: Caleta Club Náutico (sistema urbano). Se extrajo sangre de la vena femoral. Las muestras se tiñeron con el método May Grünwald-Giemsa y se observaron bajo un microscopio con el objetivo de inmersión. Las frecuencias de micronúcleos (FMN) y alteraciones nucleares (FAN) se determinaron cada 1000 eritrocitos observados. Se encontró diferencia significativa (p<0,05) entre el sitio PD y los otros sitios (AG y SU), tanto para FMN (p=0,0021) como para FAN (p=0,0011). Los valores de las frecuencias más altos correspondieron al sitio AG (FMN: 3,33±0,62; FAN: 4,67±0,56). Finalmente, el biomonitoreo con P. hilarii fue útil, por lo que podría considerarse como especie bioindicadora para evaluar la calidad de los ambientes de Argentina.

The micronucleus test (MN) is a biomarker of non-destructive genotoxicity that allows chromosomal damage and other nuclear alterations (NA) to be detected. Phrynops hilarii is a freshwater chelonium that inhabits regions of central-northern Argentina. The main objective was to determine the presence of MN and other NA in erythrocytes of natural populations of P. hilarii comparing their frequencies between three sites, two anthropized and one of control (cities of Diamante and Paraná) of Entre Ríos, Argentina, during the period 2015-2016. Eighteen individuals (six per sampling site) were evaluated at the sites: 1- PD: Pre-Delta National Park (control), 2- AG: Salto Ander Egg (agroecosystem) and 3- SU: Caleta Club Náutico (urban system). Blood was obtained from the femoral vein. The samples were stained with the May Grünwald-Giemsa method and observed under a microscope with an immersion objective. Micronucleus (MNF) and nuclear alterations (NAF) frequencies were determined every 1000 erythrocytes observed. A significant difference (p<0.05) was found between the PD site and the other sites (AG and SU), both for MNF (p=0.0021) and for NAF (p=0.0011). The highest frequency values corresponded to the AG site (MNF: 3.33 ± 0.62; NAF: 4.67 ± 0.56). Finally, biomonitoring with P. hilarii was useful, so it could be considered as a bioindicator species to assess the quality of Argentina's environments.